DNA序列測(cè)定分手工測(cè)序和自動(dòng)測(cè)序,手工測(cè)序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學(xué)降解法。自動(dòng)化測(cè)序?qū)嶋H上已成為當(dāng)今 dna序列分析的主流。美國pe abi公司已生產(chǎn)出373型、377型、310型、3700和3100型等dna測(cè)序儀,其中310型是臨床檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中使用*多的一種型號(hào)。 1.bigdye測(cè)序反應(yīng)試劑盒 主要試劑是bigdye mix,內(nèi)含pe**四色熒光標(biāo)記的ddntp和普通dntp,amplitaq dna polymerase fs,反應(yīng)緩沖液等。
2.pgem-3zf (+) 雙鏈dna對(duì)照模板 0.2g/l,試劑盒配套試劑。
3.m13(-21)引物 tgtaaaacgacggccagt,3.2μmol/l,即3.2pmol/μl,試劑盒配套試劑。
4.dna測(cè)序模板 可以是pcr產(chǎn)物、單鏈dna和質(zhì)粒dna等。模板濃度應(yīng)調(diào)整在pcr反應(yīng)時(shí)取量1μl為宜。本實(shí)驗(yàn)測(cè)定的質(zhì)粒dna,濃度為0.2g/l,即200ng/μl。
5.引物 需根據(jù)所要測(cè)定的dn**段設(shè)計(jì)正向或反向引物,配制成3.2μmol/l,即3.2pmol/μl。如重組質(zhì)粒中含通用引物序列也可用通用引物,如m13(-21)引物,t7引物等。
6.**去離子水或三蒸水。
7.0.2ml或和0.5ml的pcr管 蓋體分離,pe公司產(chǎn)品。
8.3mol/l 醋酸鈉(ph5.2) 稱取40.8g naac·3h2o溶于70ml蒸餾水中,冰醋酸調(diào)ph至5.2,定容至100ml,高壓**后分裝。
9.70%乙醇和無水乙醇。
10.naac/乙醇混合液 取37.5ml無水乙醇和2.5ml 3mol/l naac混勻,室溫可保存1年。
11.pop 6測(cè)序膠 abi產(chǎn)品。
12.模板抑制試劑(tsr) abi產(chǎn)品。
13.10×電泳緩沖液 abi產(chǎn)品。
14.a(chǎn)bi prism 310型全自動(dòng)dna測(cè)序儀。
15.2400型或9600型pcr儀。
16.臺(tái)式冷凍高速離心機(jī)。
17.臺(tái)式高速離心機(jī)或袖珍離心機(jī)。
尊敬的客戶:
您好,我司致力為廣大用戶提供高品質(zhì)產(chǎn)品、完整的解決方案和上等的技術(shù)服務(wù)公司。主要產(chǎn)品有
二手儀器,
DNA合成儀,
LC-MS液質(zhì)聯(lián)用儀,
定量PCR儀,
HPLC液相色譜儀,測(cè)序儀 等等。您可以通過網(wǎng)頁撥打本公司的服務(wù)專線了解更多產(chǎn)品的詳細(xì)信息,至善至美的服務(wù)是我們永無止境的追求,歡迎新老客戶放心選購自己心儀產(chǎn)品,我們將竭誠為您服務(wù)!