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高效液相色譜儀操作
1). 過濾流動相,根據須要選擇區別的濾膜。
2). 對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
3). 打開HPLC工作站(包含計算機軟件和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統。
4). 進入HPLC控制界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。
5). 有一段時間沒用,或者換了新的流動相,須要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,須要在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖洗時速度不要超過10 ml/min。
6). 調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。點擊injure,選用合適的流速,點擊on,走基線,觀察基線的情況。
7). 設計走樣方案。點擊file,選取select users and methods,可以選取現有的各種走樣方案。若需建立一個新的方案,點擊new method。選取須要的配件,包含進樣閥,泵,檢測器等,根據須要而區別。選完后,點擊protocol。一個完整的走樣方案須要包含:a.進樣前的穩流,一般2-5分鐘;b.基線歸零;c.進樣閥的loading-inject轉換;d.走樣時間,隨區別的樣品而區別。
8). 進樣和進樣后操作。選定走樣方案,點擊start。進樣,所有的樣品均需過濾。方案走完后,點擊postrun,可記錄數據和做標記等。全部樣品走完后,再用上面的方案走一段基線,洗掉剩余物。
9). 關機時,先關計算機,再關液相色譜。
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